文献|文章影响因子高竟是因为ta？
上周，Web of Science公布了2022年度SCI期刊影响因子
HUABIO抗体表现优异，助力高分文献
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Vol.1
信号转导（signal transduction）是生命活动的基本机制，可以调控机体代谢、生长以及再生等多种生命活动。尽管信号转导已经被研究很多年，但是有关信号转导的时空调控机制还不清楚，尤其是信号通路中的级联放大效应以及复杂的交叉（cross-talk）网络。生物大分子的液-液相分离（Liquid-liquid phase separation）是驱动细胞内区室形成的重要方式，参与无膜细胞器的形成，调控基因转录、DNA损伤修复以及自噬等众多生物学过程。
2022年6月28日，浙江大学基础医学院周以侹/郑莉灵团队课题组在《Cell Discovery》杂志（IF=38.079）在线发表了研究论文：“Phase separation of Insulin Receptor Substrate 1 drives the formation of insulin/IGF-1 signalosomes”
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研究结论
研究团队发现IRS-1的C端经历了液-液相分离（LLPS）。静电和疏水相互作用都可以驱动IRS-1 LLP。IRS-1的自结合主要由301-600区域介导，驱动IRS-1 LLP形成胰岛素/IGF-1信号小体。此外，招募下游效应子的YXXM基序的酪氨酸残基也有助于IRS-1自结合和LLP。IRS-1 LLP的作用减弱了其对胰岛素/GF-1信号传导的积极作用。代谢性疾病相关G972R突变损害IRS-1的自结合和LLP。
该研究揭示了IRS-1介导的信号小体的LLP作为胰岛素/IGF-1信号传导的组织中心的机制，并暗示了异常IRS-1 LLP在代谢性疾病中的作用。
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Vol.2
肠道组织是体内重要的“免疫-代谢-菌群”交互调控器官，其稳态的维持对于肠道生理功能的发挥并抵抗病原微生物的侵入至关重要。肠道上皮细胞中的杯状细胞（goblet cell）通过分泌粘液蛋白（mucin）形成贴附在上皮层面上的粘液层（mucus layer）进而隔离并控制肠道微生物的定殖和侵入，在肠道免疫中发挥关键性作用。然而目前对于肠道杯状细胞如何分泌粘液蛋白并维持粘液层的形成及其关键控制分子仍不明确。
Gasdermin-D（GSDMD）是近些年发现的一种介导细胞裂解性死亡的成孔蛋白，能够在不同病理条件下介导细胞焦亡并促进炎症反应。在这方面研究中，中国学者做出了一系列重要的开创性工作。值得注意的是，GSDMD是否在非免疫细胞中存在着独立于焦亡和炎症的其他功能也成为领域内重要的科学问题并引起大家的关注。
2022年2月4日，浙江大学基础医学院王迪课题组在Science Immunology（IF=30.630）以封面文章的形式发表了题为“Epithelial Gasdermin D shapes the host-microbial interface by driving mucus layer formation”的研究论文。
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研究结论
研究发现，GSDMD在稳态情况下对于肠道杯状细胞分泌粘蛋白并形成粘液层从而维持肠道免疫稳态具有重要的调控作用。在肠道上皮细胞中特异性敲除GSDMD会导致小鼠在生理情况下缺失肠道粘液层并导致肠道微生物对上皮屏障的物理性贴附，而基因敲除小鼠对肠道病原菌感染也表现出更强的易感性。该现象的分子机制在于杯状细胞中活化的GSDMD会通过Ca2+-Scinderin依赖的细胞骨架重塑介导粘液囊泡外排（mucin granule exocytosis）。
该研究揭示了GSDMD蛋白以非焦亡方式（non-pyroptotic）参与介导肠道杯状细胞分泌型囊泡的外排，塑造肠道屏障稳态的重要生理作用。
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研究过程
研究人员首先检测并发现GSDMD在小鼠大肠组织的上皮细胞中有明显的表达以及活化切割，并证实该上皮细胞中GSDMD的活化依赖于NLRP6炎症小体。
GSDMD在肠道上皮细胞中生理性表达及活化的意义是什么？
为了回答这个问题，研究人员构建了肠道上皮细胞GSDMD特异性敲除小鼠（GsdmdΔIEC），通过组织学染色、扫描电子显微镜（SEM）和透射电子显微镜（TEM）等手段，惊奇地发现GsdmdΔIEC小鼠大肠中的粘液层几乎消失，同时有大量囊泡状的“凸起物”出现在肠道上皮表面，TEM结果提示这些“凸起物”是由多个单独包裹的囊泡组成并存在于杯状细胞中。GsdmdΔIEC小鼠中有大量肠道共生菌直接贴附到肠道上皮表面。同时通过柠檬酸杆菌（Citrobacter rodentium）定植实验发现GsdmdΔIEC小鼠表现出更严重的细菌感染情况以及更差的细菌排空效果。这些结果表明上皮细胞中的GSDMD对于维持肠道杯状细胞分泌粘蛋白并形成粘液层，从而分隔肠道上皮与肠道菌群，抵御外来感染发挥关键的作用。
为了更好地模拟体内的环境，同时方便检测肠道受不同信号刺激后粘液层的变化，研究人员基于3D打印技术构建了一套肠道体外活体培养及检测体系，同时结合透明化成像技术对肠道粘液层实现了动态可视化观察。通过对离体肠道给予多种已知或潜在的细菌来源的刺激物处理，发现革兰氏阴性菌来源的LPS或肠道共生菌-脆弱拟杆菌（Bacteroides fragilis）能够有效的刺激肠道粘液层的形成。同时通过LDH释放和PI 体内注射等一系列实验发现GSDMD活化并刺激粘液分泌的过程并不伴随着细胞死亡。这些结果表明生理情况下肠道共生菌能够提供杯状细胞中GSDMD活化的信号，同时活化的GSDMD以非焦亡依赖的方式促进杯状细胞分泌粘液，从而维持正常的肠道屏障稳态。
机制上，研究人员通过小鼠肠道蛋白质组分析等手段，发现GsdmdΔIEC小鼠大肠中的肌切蛋白（Scinderin）蛋白下调最明显，并且GO分析表明分泌型囊泡外排通路受到明显抑制。Scinderin是一种细胞骨架调控蛋白，在维持细胞囊泡运输（如神经递质的分泌）中具有重要的作用，同时Scinderin在细胞内发挥作用依赖于Ca2+的浓度。研究人员通过一系列实验最终证实GSDMD通过Ca2+-Scinderin依赖的细胞骨架重塑促进粘液囊泡外排。
研究助力
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其中，为研究做出贡献的
Anti-AKT (ET1609-47)，
Anti-GFP (ET1607-31)，
Anti-Beta actin (M1210-2)，
Anti-TOMM20 (ET1609-25)
均来自华安生物
01
Anti-AKT1 Recombinant Rabbit Monoclonal Antibody [ST05-09]
重组兔单抗 | 货号: ET1609-47
AKT也称为蛋白激酶B（PKB）或RAS-α，是一种无处不在的丝氨酸/苏氨酸激酶，在各种生物反应中起重要作用，例如通过磷酸化多种蛋白质来调节代谢，细胞存活和生长。这种蛋白激酶被胰岛素，PI3K，IGF1和各种其他生长和生存因子激活。Akt通过磷酸化和灭活几个靶标（包括叉头转录因子和半胱天冬酶-9）来抑制细胞凋亡，从而促进细胞存活。AKT途径是发现癌症药物的主要靶点。
Western blot analysis of AKT1 on different lysates.
Positive control:
Lane 1: BT-20 cell lysate
Lane 2: MCF-7 cell lysate
02
Anti-GFP Recombinant Rabbit Monoclonal Antibody [SY0243]
重组兔单抗 | 货号: ET1607-31
绿色荧光蛋白（GFP）最初被鉴定为参与维多利亚水母生物发光的蛋白质。GFP cDNA在原核细胞中表达时产生荧光产物，无需外源性底物或辅助因子，使GFP成为监测体内基因表达和蛋白质定位的有用工具。已经开发了几种GFP突变体，包括EGFP，其荧光比野生型GFP更强烈，并且已经改变了激发最大值，使它们可用于FACS和荧光显微镜以及双标记应用。GFP在表达载体中被广泛用作融合蛋白标签，允许表达和监测融合到GFP的异源蛋白。
GFP tag was immunoprecipitated in 5µg GFP Tag fusion protein lysate with ET1607-31 at 2 µg/20 µl agarose.
Lane 1: GFP Tag fusion protein lysate (input).
Lane 2: Rabbit IgG instead of ET1607-31 in GFP Tag fusion protein lysate.
Lane 3: ET1602-7 IP in GFP Tag fusion protein lysate.
Lane 4: ET1604-25 IP in GFP Tag fusion protein lysate.
Lane 5: ET1604-26 IP in GFP Tag fusion protein lysate.
Lane 6: ET1607-31 IP in GFP Tag fusion protein lysate.
Lane 7: R1312-2 IP in GFP Tag fusion protein lysate.
03
Anti-Beta actin antibody [B4-B2]
小鼠单抗 | 货号: M1210-2
Beta actin也称为细胞质肌动蛋白，是一种43 kDa，高度保守的蛋白质，在所有真核细胞中普遍表达。它们与微管一起构成细胞骨架的主要成分。Beta actin是一种相对稳定的细胞骨架蛋白，通常在细胞中处于恒定水平，无论实验治疗或技术程序如何。因此，Beta actin的测量通常用作实验误差的内部对照。在脊椎动物中，已经确定了3组主要的肌动蛋白亚型，α，β和γ。α actin存在于肌肉组织中，是收缩器官的主要成分。β和γ actin在大多数细胞类型中作为细胞骨架的组成部分和内部细胞运动的介质共存。
Western blot analysis of Beta actin on different lysates.
Positive control:
Lane 1: NIH/3T3 cell lysate
Lane 2: PC-12 cell lysate
Lane 3: MCF-7 cell lysate
Lane 4: HepG2 cell lysate
Lane 5: Hela cell lysate
Lane 6: Mouse lung tissue lysate
ICC staining of Beta actin in NIH/3T3 cells (red).
04
Anti-TOMM20 Recombinant Rabbit Monoclonal Antibody [ST04-72]
重组兔单抗 | 货号: ET1609-25
外膜（Tom）的线粒体前蛋白转座酶是一种多亚基蛋白质复合物，有助于在线粒体外膜上导入核编码的前体蛋白。Tom机器由用于细胞溶质合成的预蛋白初始结合的导入受体和用于各种前蛋白的膜易位到线粒体中的一般导入孔（GIP）组成。导入受体包括Tom20和Tom22，它们形成异构受体复合物，启动新合成的蛋白质插入外膜，然后将前体蛋白引导到GIP中。在酵母中，Tom22是进口受体复合物的重要组成部分，因为它既是前蛋白的受体，又是Tom20和GIP的对接点。
Western blot analysis of TOMM20 on different lysates.
Positive control:
Lane 1: Hela cell lysate
Lane 2: MCF-7 cell lysate
Lane 1: F9 cell lysate
Lane 2: PC-12 cell lysate
立足科研，追求卓越。
十五载的坚持与创新，塑造了华安生物的骨肉与灵魂。
华安生物不断聆听客户需求，把握产品质量。
未来我们还会不断上新更多优质的产品，敬请期待！
END
●杭州华安生物技术有限公司再次捐赠支持浙江大学生命科学学院人才培养
华安生物
杭州华安生物技术有限公司 (HUABIO，以下简称“公司”) 成立于2007年，总部位于浙江杭州。公司致力于为全球科学研究的科学家、体外诊断公司以及药物发现的工业客户提供最高品质的抗体和技术服务。
公司采用基于结构生物学的抗原设计，单克隆B细胞筛选的重组抗体开发，以及多维度的质量验证体系等一系列有自主专利保护的技术和流程，生产出具有高灵敏性，高特异性，无批次差异的核心抗体产品。另外，由多名博士组成的科学家团队专攻抗体结构改造及深加工，在为科学家提供创新工具的同时，不断提升公司的技术水平。公司通过了ISO9001和ISO13485质量体系认证，不仅保证了科学的严谨性，并且有效地控制了项目周期和成本。公司的目录产品包括重组兔单抗、小鼠单抗、兔多抗、羊驼抗体、荧光直标抗体、二抗、细胞因子/蛋白、ADC药品小分子检测抗体等，尤其是技术难度很高的修饰性抗体，也得到了全球顶尖科学家们的高度认可。
公司是国家高新技术企业，杭州市企业高新技术研发中心，并拥有十数项技术发明、实用新型专利及各种荣誉。
杭州华安生物技术有限公司
www.huabio.cn
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